Механизм размножения вируса герпеса в клетке. Репродукция герпесвирусов. Репликативный цикл герпесвирусов. Поксвирусы. Репродукция поксвирусов Лечение герпетической инфекции

ВПГ тип 2 (Herpes simplex virus тип 2 - HSV-2), или герпесвирус человека ГВЧ-2;
3. Вирус ветряной оспы - опоясывающего герпеса (Varicella-zoster virus - VZV), или герпесвирус человека ГВЧ-3;
4. Вирус Эпстайна-Барр - ВЭБ (Epstein-Barr virus, EBV), или герпесвирус человека ГВЧ-4;
5. Цитомегаповирус - ЦМВ, или герпесвирус человека ГВЧ-5;
6. Герпесвирус человека тип б - ГВЧ-6 (Human herpesvirus - HHV-6), или герпесвирус человека ГВЧ-б;
7. Герпесвирус человека тип 7 - ГВЧ-7 (Human herpesvirus - HHV-7);
8. Герпесвирус человека тип 8 - ГВЧ-8 (Human herpesvirus - HHV-8).

"Подсемейство включает также В-вирус обезьян старого света, вызывающий летальное неврологическое поражение.

Рис. 4.26.

Рис. 4.28

Репродукция . После прикрепления к рецепторам клетки оболочка вириона сливается с клеточной мембраной (1, 2). Освободившийся нуклеокапсид (3) доставляет в ядро клетки ДНК вируса. Далее происходит транскрипция части вирусного генома (с помощью клеточной ДНК-зависимой РНК-полимеразы); образовавшиеся иРНК (4) проникают в цитоплазму где происходит синтез (трансляция) самых ранних альфа-белков (I), обладающих регулирующей активностью. Затем синтезируются ранние бета-белки (П) - ферменты, включая ДНК-зависимую ДНК-полимеразу и тимидинкиназу, участвующие в репликации геномной ДНК вируса. Поздние гамма- белки (Ш) являются структурными белками, включая капсид и гликопротеины (А, В, С, D, Е, F, G, X). Гликопротеины диффузно прилегают к ядерной оболочке (5). Формирующийся капсид (6) заполняется вирусной ДНК и почкуется через модифицированные мембраны ядерной оболочки (8). Перемещаясь через аппарат Гольджи, вирионы транспортируются через цитоплазму и выходят из клетки путем экзоцитоза (9) или лизиса клетки (10).

Клинически значимые представители семейства

Вирус простого герпеса относится к семейству Herpesviridae, роду Simplexvirus. Вызывает простой герпес (herpes simplex), характеризующийся везикулезными высыпаниями на коже, слизистых оболочках, поражением центральной нервной системы и внутренних органов, а также пожизненным носительством (персистенцией) и рецидивами болезни.
Вирус простого герпеса включает два типа: ВПГ-1 и ВПГ-2; распространен повсеместно, поражает большую часть населения Земли и существует в организме в латентной форме до момента реактивации.
ВПГ-1 поражает преимущественно область рта, глаз, ЦНС, а ВПГ-2 - гениталии, за что и получил название генитального штамма.
Структура. Структура ВПГ сходна с другими герпесвирусами. Геном ВПГ кодирует около 80 белков, необходимых для репродукции вируса, взаимодействия вируса с клетками организма и иммунным ответом. ВПГ кодирует 11 гликопротеинов, являющихся прикрепительными белками (gB, дС, gD, дН), белками слияния (дВ), структурными белками, иммунными белками «уклонения» (дС, дЕ, gl) и др. Например, СЗ-компонент комплемента связывается с дС, а Fc-фрагмент IgG связывается с gE/gl- комплексом, маскируя вирус и вирус-инфицированные клетки. Существуют гликопротеины, имеющие общие антигенные детерминанты (gB, gD) для ВПГ-1 и ВПГ-2.

Рис. 4.27. Электронограмма ультратонкого среза вируса Эпстайна-Барр (по А. Ф. Быковскому)

Рис. 4.29. Электронограмма ультратонкого среза ВПГ: 1 - оболочка; 2 - капсид; 3 - тегумент. (По А. Ф. Быковскому и др.)

Рис. 4.30.

Микробиологическая диагностика . Исследуют содержимое герпетических везикул, слюну, соскобы с роговой оболочки глаз, кровь, сперму, мочу, цереброспинальную жидкость и мозг, при летальном исходе. В мазках, окрашенных по Романовскому-Гимзе, наблюдают синцитий - гигантские многоядерные клетки с увеличенной цитоплазмой и внутриядерными включениями Каудри. Заражают культуру клеток HeLa, Нер-2, человеческих эмбриональных фибробластов. Проводят внутримозговое заражение куриных эмбрионов или мышей-сосунков, у которых развивается энцефалит. Идентификация вируса: РИФ и ИФА с использованием моноклональных антител; ПЦР. Серодиагностику проводят с помощью РСК, РИФ, ИФА и PH по нарастанию титра антител (IgM, IgG).

Специфическая профилактика рецидивирующего герпеса осуществляется в период ремиссии многократным введением инактивированной культуральной герпетической вакцины.

Исследовательский медицинский университет им.

Н.И.Пирогова

Минздравсоцразвития России

КАФЕДРА МИКРОБИОЛОГИИ И ВИРУСОЛОГИИ

Заведующая кафедрой – Кафарская Людмила Ивановна

Реферат на тему: «простой герпес»

Выполнил студент 244 группы

Колпаков Дмитрий

Проверил преподаватель:

Харитонов Анатолий Аркадьевич

Москва 2013

1)Таксономическое положение – семейство род, вид 2)Морфология; 3)Репродукция герпесвирусов 4)Антигенные свойства; 5)Патогенез; 6)Диагностика 7)Лечение 8)Иммунитет

1)Таксономическое положение – семейство род, вид

Простой герпес (herpes simplex), семейство herpesviridae, подсемейство альфа-herpesviridae, род simplexvirus, ГВЧ 1 и 2 типа

2)Морфология;

Крупные оболочечные ДНК содержащие вирусы. Размеры вириона 150-200 нм. Вирус имеeт капсид из 162 капсомеров, а также суперкапсид. Капсид содержит линейную двухнитевую ДНК, в которой присутствуют около 80 генов. Тип симметрии кубический.

Культивируются в культурах живых клеток и вызывают их многоядерность. Чувствительны к нагреванию, быстро инактивируются УФ и дезинфицирующими средствами.

3)Репродукция герпесвирусов

Основные отличия репродуктивного цикла герпесвирусов от остальных ДНК-вирусов связаны с более сложной структурой генома. Адсорбция вирусов на клетках осуществляется через специфические рецепторы. После взаимодействия с рецепторами вирусная оболочка сливается с клеточной мембраной, а нуклеокапсид высвобождается в цитоплазму. Раздевание (депротеинизация) вирусного генома происходит на ядерной мембране, и вирусная ДНК оказывается в ядре клетки-хозяина. Репродукция включает раннюю и позднюю стадии, однако они разграничиваются нечётко. Ранняя стадия репродукции герпесвирусов. В ранней стадии синтезируются «ранние белки», кодируемые проксимальной третью молекулы ДНК. Они проявляют регуляторные свойства, включая активацию транскрипции других участков вирусного генома, кодирующих ДНК-полимеразу и ДНК-связывающие белки. Поздняя стадия репродукции герпесвирусов. В позднюю стадию вирусная ДНК-полимераза индуцирует репликацию материнской ДНК. В результате образуются молекулы ДНК дочерней популяции. Часть дочерней ДНК считывают клеточные полимеразы, что вызывает транскрипцию концевых генов, кодирующих структурные протеины (белки оболочки и гликопротеины шипов). Сборка дочерних популяций герпесвирусов осуществляется в ядре, где капсидные белки окружают молекулы ДНК, формируя нуклеокапсиды. Финальная стадия морфогенеза герпесвирусов - формирование суперкапсида на внутренней поверхности ядерной мембраны. Зрелые дочерние популяции отпочковываются от модифицированной ядерной мембраны, транспортируются через цитоплазму и выделяются наружу.

4)Антигенные свойства;

Типоспецифические антигены представлены гликопротеинами капсида, на основе которых и выделяют два типа вирусов: HSV-1 и HSV-2 . Группоспецифические антигены представлены нуклеопротеидами. Поверхностный гликопротеин gpC-группоспецифический, поверхностные гликопротеиды gpB, gpD- типоспецифические.

5)Патогенез;

Вирус герпеса не способен проникать через неповреждённый роговой слой кожи, что обусловлено отсутствием на нём специфических рецепторов. Герпес передаётся при прямом контакте повреждённых покровов с поражёнными участками кожи или с биологическими жидкостями инфицированного человека. Вирус HSV-2 типа передаётся исключительно транскутанно (через кожу).

Внешняя оболочка вируса сливается с клеточной мембраной. Далее вирусный нуклеокапсид оказывается в нейроплазме, где и происходит высвобождение вирусной ДНК. Далее она транспортируется по дендритам нервных окончаний в тело чувствительного нейрона, находящееся в сенсорном ганглии, где встраиваются в его генетический аппарат навсегда. После проникновения вируса начинается процесс его активного воспроизводства в клетке - персистенция. При лабиальных поражениях характерна персистенция вируса в нейроцитах чувствительных ганглиев тройничного нерва, а при генитальных - поясничных.

У большинства людей воспроизводство и выделение вируса сразу после инфицирования происходит бессимптомно. Это может произойти более чем за неделю до или после появления первых симптомов в 50 % случаев. Возбудитель интенсивно в нем размножается, запуская литический, продуктивный тип инфекции. Происходит очаговая дегенерация эпителия: клетки увеличиваются в размерах, затем погибают, образуя очаги некроза.

Вирусы герпеса имеют циклические периоды активности (в течение 2-21 дней формируются пузырьки, содержащие вирусные частицы) и периоды ремиссии, во время которых язвочки пропадают. Генитальный герпес (HSV-2-типа), чаще протекает бессимптомно, хотя вирус размножается и может передаваться другим людям. Это наиболее характерно для вируса HSV-2-типа. Рецидивы заболевания не определены во времени, хотя выявлены некоторые триггеры заболевания. К таким факторам относится воздействие иммунодепрессантов (см. ниже ). При рецидиве вирус, находящийся в латентной стадии, активируется, в результате чего образуется множество инфекционных частиц, движущихся по отросткам нейрона, из которых они в дальнейшем переходят в эпителий кожи и слизистых оболочек. Часто снова возникают пузырьки, сопровождающиеся некротическим повреждением эпителия. Цикл репродукции вируса - 10 часов. С течением времени у организма формируется противовирусный иммунитет и частота и тяжесть рецидивов уменьшается.

Носительство чаще всего продолжается в течение первых 12 месяцев после инфицирования. Продолжительность такого носительства при иммунодефицитах (например при ВИЧ-инфекции ) больше. После заражения организм начинает синтезировать антитела против конкретного HSV-типа вируса, предотвращая распространение инфекции. В случае заражения вирусом HSV-1-типа, такая сероконверсия (выработка антител) защитит организм от прочих инфекционных процессов, вызываемых этим вирусом, таких как генитальный герпес, герпетический кератит и панариций.

Антитела, которые вырабатываются после первоначальной герпетической инфекции, предотвращают заражение тем же типом вируса: у людей, перенёсших ротолицевой герпес HSV-1-типа не бывает панариция или генитального герпеса, вызываемого HSV-1.

В моногамном браке, серонегативная женщина имеет риск заражения от серопозитивного мужчины выше 30 % в год. При первой оральной инфекции продукция защитных антител займёт 6 недель, после чего гуморальный иммунитет будет способен защитить организм от повторной генитальной инфекции.

6)Диагностика

Серологический метод. Серологический метод с IgM не позволяет различить антитела к HSV-1 и HSV-2 типам вирусов. Тем не менее, новый иммуноточечный гликопротеин G-специфичный HSV-тест даёт более чем 98 % специфичность и позволяет, таким образом, различить HSV-1 и HSV-2 типы герпеса. Некоторые зарубежные клиницисты считают, что в скором времени тест с IgM будет вытеснен новым.

Цитологический метод. В соскобе поражённого участка эпителия, окрашенного по Романовскому - Гимзе, обнаруживают многоядерные клетки с внутриклеточными включениями.

Вирусологический метод. Заражают культуры клеток и выявляют цитопатологическое действие (ЦПД) в виде гигантских многоядерных клеток с включениями, которые разрушаются. Идентификацию осуществляют в реакции нейтрализации ЦПД, РИФ с моноклональными антителами. На хорионаллантоисной мембране куриных эмбрионов через 2-3 суток образуются белые бляшки.

Биологический метод. При нанесении вирусного материала на скарификацию роговицы кролика возникает кератит, а в мозгу новорождённых мышат - энцефалит.

Иммунофллюоресцентный метод,кожная аллергическая проба, пцр

7)Лечение

На данный момент не существует метода, позволяющего удалить вирус из организма. Антивирусные препараты лишь снижают частоту, продолжительность и тяжесть рецидивов. Анальгетики, например ибупрофен и парацетамол только уменьшают боль и лихорадку. Местные анестетики, такие как прилокаин, лидокаин, бензокаин илитетракаин также снимают зуд и болевые ощущения.

Против герпетических инфекций эффективны: ацикловир, валацикловир, фамцикловир, пенцикловир. Ацикловир был открыт первым, существует множество его дженериков.

Доказано, что ацикловир и валацикловир эффективны при лечении лицевого герпеса (на губах), в том числе у раковых больных. Доказательства в поддержку использования ацикловира при терапии первичного герпетического гингивостоматита, не так сильны.

8)Иммунитет

При первичном инфицировании образуются IgМ-антитела, при рецидивах - IgG и IgА. Вследствие персистенции вируса у инфицированных людей иммунитет является нестерильным и временным - при снижении иммунитета, особенно дефиците естественных киллеров (ЕК), наступает рецидив. Кроме того, вирус герпеса сам способен индуцировать иммунодефицит, одним из механизмов которого является стимуляция синтеза «неэффективных» IgG-антител, которые супрессируют иммунитет, и подавляют ЕК. У людей, резистентных к инфекции, иммунитет осуществляется системой интерферонов, естественных киллеров и Т-киллеров, а также sIgA-антителами. У 80-90 % взрослых имеются IgG-антитела к ВПГ-1. Уровень иммунитета значительно влияет на количество и выраженность рецидивов.

n Вирусы герпеса (от греч. herpes - ползучий) - ДНК содержащие n Ежегодно ВПГ инфицируются 20 млн. человек

n alphaherpesvirinae а) вирус простого герпеса человека I типа (ВПГ-1) ГВЧ-1 б) вирус простого герпеса человека II типа (ВПГ-2) ГВЧ-2 в) вирус ветряной оспы и опоясывающего герпеса ГВЧ-3 род Varicellovirus (VZV – Varicella-zoster virus)

n betaherpesvirinae а) цитомегаловирус (ЦМВ) ГВЧ-5 род Cytomegalovirus б) вирус экзантемы младенцев (поражаются дети до 3 лет) ГВЧ-6 в) вирус синдрома хронической усталости ГВЧ-7

n gammaherpesvirinae а) вирус Эпштейна-Барра (инфекционный мононуклеоз и лимфома Беркета) ГВЧ-4 род Lymphocryptovirus б) вирусы, ассоциированные с саркомой Капоши ГВЧ-8 род Radinovirus

Свойства вирусов: n размер 150 - 210 нм, сферической или овальной формы n ДНК линейная, 2 х-нитевая n белковый капсид формы икосаэдра, состоит из 162 капсомеров n гликолипопротеиновая оболочка с гликопротеиновыми шипами n между капсидом и гликопротеиновой оболочкой расположен тегумент – это белки, ферменты, необходимые для репликации

Репродукция вируса n Оболочка вируса прикрепляется к рецепторам мембраны клетки-мишени n Слияние и проникновение путём рецепторного эндоцитоза n Освобожденный нуклеокапсид проникает в ядро клетки. Происходит транскрипция (ДНК в и. РНК), затем и-РНК проникает в цитоплазму

Репродукция вируса n начинается синтез неструктурных (регуляторы синтеза и ферменты) и структурных белков (капсид, ГП). ГП прилегают к ядерной мембране n сформированный капсид заполняется ДНК и почкуется через ядерную оболочку в цитоплазму n происходит выход (экзоцитоз или лизис клетки)

Общие свойства для вирусов подсемейства alphaherpesvirinae Быстрый рост n Размножаются в эпителии кожи и слизистых оболочек n Обладают цитолитическим действием n Сохраняются в нейронах n Вызывают латентную персистирующую инфекцию n

Общие свойства для вирусов подсемейства betaherpesvirinae Медленный рост n Тропность к эпителию слюнных желез, миндалин, почек, лимфоцитам n Обладают цитомегалическим (гигантские клетки) и лимфопролиферативным действиями n

Общие свойства для вирусов подсемейства gammaherpesvirinae Растут только в лимфобластах n Обладают лимфопролиферативным действием n Стимулируют размножение В-лимфоцитов и вызывают в них персистирующую инфекцию n Инфицируют лимфоидную ткань, слюнные железы, эпителий рта и глотки n

Культивирование Зависит от конкретного вируса куриный эмбрион n клеточные линии (гибель, пролиферация, ядерные включения – остатки капсидов выявляемые при окраске по Романовскому -Гимзе) n

Антигенная структура Два антигенных комплекса – n Капсидный - группоспецифичный n Гликопротеидный – видоспецифичный, типоспецифичный

Общие признаки герпесвирусов n n n n Антропонозы Малоустойчивы во внешней среде. Политропны – нет строгой органотропности Длительная персистенция (хроническая персистирующая инфекция с обострениями) Иммунодепрессия (подавление клеточного иммунитета) Защита от вируса с помощью Т-киллеров и макрофагов, которые уничтожают пораженные клетки Антитела протективными свойствами не обладают

Подсемейство alphaherpesvirinae Открыты Грютером в 1912 г 1. ВПГ I типа (острый стоматит, кератоконъюнктивит, фарингит, менингоэнцефалит) до 10% населения носители этого вируса. Пути передачи - воздушно-капельный, контактный (мать-ребенок до 3 лет), трансплацентарный. 2. ВПГ II типа (герпес у новорожденных, генитальный герпес, рак шейки матки). n Пути передачи - половой, при родах заражение ребенка

Herpes Simplex Virus n Negative stain n Color photo Оба вируса обладают ЦПД – образование пузырей (везикулёзные высыпания) Иммунитет Ig M – свежая инфекция, Ig G – хроническая или персистирующая.

Подсемейство alphaherpesvirinae ВПГ 1 и ВПГ 2 Лабораторная диагностика n Исследуемый материал: соскоб с везикул, слюна, мазок из цервикального канала при генитальном герпесе, кровь при генерализации, ликвор при менингите или энцефалите. n Экспресс-диагностика. РИФ, ПЦР, микроскопия (внутриклеточные включения и гигантские многоядерные клетки)

Подсемейство alphaherpesvirinae ВПГ 1 и ВПГ 2 Лабораторная диагностика n Вирусологический метод - куриный эмбрион - ХАО (бляшки), заражение мышей в мозг (энцефалит), кроликов в роговицу глаза (кератит), культура клеток почек кролика (гигантские клетки с внутриядерными включениями) Идентификация по РН, РСК, ИФА n Серодиагностика по ИФА (IG M, G)

Подсемейство alphaherpesvirinae ВПГ 1 и ВПГ 2 Специфическая профилактика рецидивов: герпетическая лечебная культуральная инактивированная вакцина (снижает частоту рецидивов, но не излечивает). n Лечение: виролекс, ацикловир, фамвир. n

Подсемейство alphaherpesvirinae 3. n n Вирус Varicella-zoster (VZV) или ГВЧ-3 (ветряной оспы и опоясывающего лишая) открыт Араго (бразильский врач) в 1911 году Ветряная оспа имеет эпидемическое распространение

Подсемейство alphaherpesvirinae Вирус Varicella-zoster Патогенез Первичная репродукция в слизистой верхних дыхательных путей (инкубационный период – 10 -15 дней). Вирусемия Вторичная репродукция – в эпителии слизистых и кожи (цитопатическое действие)

Подсемейство alphaherpesvirinae Вирус Varicella-zoster n Образование пузыря с серозной жидкостью (везикула) n Возможно нагноение (пустула) n Образование рубца (оспина) Происходит постоянный подсев из мест репродукции, может быть до 5 и более приступов, и больного можно увидеть все элементы сыпи. У ослабленных больных – буллезная форма (огромные пузыри), геморрагическая форма и гангренозная форма.

Подсемейство alphaherpesvirinae Вирус Varicella-zoster Эпидемиология n 100% контагиозность n Путь передачи - воздушно-капельный, может быть контактный (редко, т. к. мало устойчив) n Восприимчивый коллектив - взрослые и дети в случае отсутствия иммунитета

Подсемейство alphaherpesvirinae Вирус Varicella-zoster Лабораторная диагностика Исследуемый материал – смыв из носоглотки и отделяемое везикул n Экспресс-диагностика – ИФА n Вирусологический - культура фибробластов эмбриона человека (РСК). n Серодиагностика - РСК, РТГА, ИФА.

Подсемейство alphaherpesvirinae Вирус Varicella-zoster Специфическая профилактика Живые аттенуированные вакцины Окавакс (Япония), Варилрикс (Англия) Иммуноглобулин человеческий от реконвалесцентов n Лечение - интерферон, лейкинферон, виролекс n

Подсемейство betaherpesvirinae 1. Цитомегаловирусная инфекция (ГВЧ 5) n По данным ВОЗ 1 -2% детей рождаются с этой инфекцией, к 1 году жизни у 20% детей обнаруживаются антитела, к 30 -50 годам – у 100% антитела n Выделен в 1956 году в США Смитом и Родом n Морфология - большие размеры ДНК, изменяет темп роста клеток, с образованием гигантских многоядерных клеток с включениями в ядре

Подсемейство betaherpesvirinae n Патогенез Размножение в лейкоцитах и макрофагах с длительной персистенцией n Эпителиотропизм (слюнные железы и почки) n Образование инфильтратов, которые замещаются фиброзной тканью

Подсемейство betaherpesvirinae n n Клиника Врожденная ЦМВ – при инфицировании в ранние сроки беременности, плод погибает или врожденные дефекты. В поздние сроки – потеря зрения, слуха и т. д. Приобретенная ЦМВ – острая (у маленьких детей, в момент родов) или хроническая инфекция (гепато-лиенальным синдромом, поражением почек) В более поздние сроки – бессимптомная инфекция с образованием антител

Подсемейство betaherpesvirinae Эпидемиология n Источник инфекции – больные или вирусоносители (вирусы имеются во всех биологических жидкостях) n Пути передачи - трансплацентарный, через околоплодные воды, контактный, воздушно-капельный, половой

Подсемейство betaherpesvirinae Лабораторная диагностика - в моче и слюне цитомегалоклетки n Вирусологический метод - кльтура фибробластов эмбриона человека (РСК, РН). n Серологический метод - ИФА, отдельно антитела М и G, М – свежая инфекция.

Подсемейство betaherpesvirinae n n Специфическая профилактика вакцины пока нет Лечение – специфический иммуноглобулин – цитотект, применяется для лечения беременных и новорожденных

Подсемейство betaherpesvirinae 2. Вирус экзантемы младенцев ГВЧ-6 n Открыт в 1986 г. Гало n Т-лимфотропный вирус – экзантема у младенцев с внезапным повышением температуры до 40 о. С и таким же спадом на фоне сыпи.

Подсемейство betaherpesvirinae 3. Вирус синдрома хронической усталости ГВЧ-7 n Открыт Френкелем в 1990 г. n Т-лимфотропный вирус – вызывает синдром хронической усталости (субфебрилитет артралгии, слабость)

Подсемейство gammaherpesvirinae 1. Вирус Эпштейна-Барра (ВЭБ или ГВЧ-4) открыт в 1964 году, вызывает инфекционный мононуклеоз. n Описан Филатовым более 100 лет назад. n Может вызывать злокачественные заболевания – лимфома Беркита (опухоль верхней челюсти у молодых африканцев), когда играют роль условия тропиков и малярийный плазмодий или носоглоточная карцинома с рецидивирующим паротитом. n Может быть В-клеточный лейкоз.

Подсемейство gammaherpesvirinae Культивирование В-лимфоциты (вирус вызывает их пролиферацию, ЦПД отсутствует) n Антигены Капсидный Ядерный Ранний мембранный Имеют значение для серодиагностики. Ig G вырабатываются в первую очередь к капсидному и раннему мембранному АГ n

Подсемейство gammaherpesvirinae n Патогенез. Инфекция иммунной системы. первичная репродукция (слизистая полости рта и носоглотки) вторичная репродукция происходит в В-лимфоцитах, что приводит к гиперплазии лимфоидной ткани носоглотки, полилимфаденопатии, гепатоспленомегалии Может быть самоизлечение При иммунодефиците может наступить развитие лимфомы Беркита (злокачественной опухоли, состоящей из Влимфоцитов, преимущественно в головном мозге)

Подсемейство gammaherpesvirinae n Эпидемиология. Заболевание малоконтагиозно. Источник - больные и вирусоносители Пути передачи инфекции – воздушно-капельный, контактно-бытовой (при поцелуе), трансплацентарный (во время родов) ВЭБ обнаружен в слюне, секрете шейки матки Болеют преимущественно мужчины от 14 до 29 лет

Подсемейство gammaherpesvirinae Лабораторная диагностика. n Экспресс–диагностика. ПЦР для обнаружения ДНК в различных биологических жидкостях. ИФА. n Серодиагностика. ИФА для обнаружения АТ (Ig. M к капсидному АГ – свежая инфекция) Специфическая профилактика. Отсутствует

Вирусы герпеса вызывающие инфекции у человека n n n n Herpes simplex virus Type 1 (HSV-1) Herpes simplex virus Type 2 (HSV-2) Epstein Barr virus (EBV) Cytomegalovirus (CMV) Varicella Zoster Virus (VZV) Human herpes virus 6 (exanthum subitum or roseola infantum) Human herpes virus 8 (Kaposi"s sarcoma-associate herpes virus)

n n n TABLE 2 - Properties of Herpes viruses Human herpes type Name Sub Family Target cell type Latency Transmission 1 Herpes simplex-1 (HSV-1) Alphaherpesvirinae Mucoepithelia Neuron Close contact 2 Herpes simplex-2 (HSV-2) Alphaherpesvirinae Mucoepithelia Neuron Close contact usually sexual 3 Varicella Zoster virus (VSV) Alphaherpesvirinae Mucoepithelia Neuron Contact or respiratory route 4 Epstein-Barr Virus (EBV) Gammaherpesvirinae B lymphocyte, epithelia B lymphocytes Saliva 5 Cytomegalovirus (CMV) Betaherpesvirinae Epithelia, monocytes, lymphocytes Monocytes, lymphocytes and possibly others Contact, blood transfusions, transplantation, congenital 6 Herpes lymphotropic virus Betaherpesvirinae T lymphocytes and others Contact, respiratory route 7 Human herpes virus-7 (HHV-7) Betaherpesvirinae T lymphocytes and others Unknown 8 Human herpes virus-8 (HHV-8) Kaposi"s sarcoma- associated herpes virus (KSHV) Gammaherpesvirinae Endothelial cells Exchange of body fluids? Unknown

Общие свойства:

«однажды инфицирован - инфицирован на всю жизнь» .

В определенных клетках сохраняются в виде копий кольцевидных ДНК автономно от хромосом (неинтегративная вирогения). Выделяют: латентную инфекцию и реактивацию.

Морфология:

Размер вириона - от 100 до 300 нм;

Нуклеокапсид (кор) кубической симметрии, суперкапсид, аморфный слой (tegument);

Нуклеокапсид - 162 капсомера;

Линейная двунитчатая вирусная ДНК;

70-200 функциональных и структурных белков:

Сверхранние,

Поздние.

Около 30 гликопротеидов:

Поверхностные и капсидные;

- ДНК-полимераза .

Антигенные свойства. Гликопротеины внешней оболочки - типоспецифические АГ, белки нуклеокапсида - группоспецифические АГ.

Лечение герпесвирусных инфекций: а цикловир, ганцикловир - подавление ДНК-полимеразы, рибавирин - подавление ферментов, обеспечивающих кэппинг вирусной мРНК.

Вирус простого герпеса (ВПГ):

ВПГ-1 (лабиальный герпес) и

ВПГ-2 (генитальный герпес).

Культивирование:

культура ткани, ЦПД;

куриные эмбрионы - заражение в хорион-аллантоисную оболочку → бляшки (ВПГ-1 - мелкие бляшки, ВПГ-2 - крупные);

организм лабораторных животных: мыши, крысы, морские свинки, хомячки, кролики, собаки, обезьяны. Чаще - заражение кроликов (интраназально или в роговицу глаза) или мышей-сосунков (в мозг).

Патогенез ВПГ1.

Источник инфекции - человек больной в латентной или активной форме.

Механизм заражения - контактный.

Входные ворота - слизистая ротовой полости, носа и поврежденная кожа.

Первичная контаминация - в раннем детстве при контакте с инфицированной слюной (афтозный, везикулярно-эрозивный гингивостоматит ).

Вирус через нервные окончания проникает в регионарные ганглии чувствительных нервов (ганглии тройничного нерва), где сохраняется в ядрах нейронов в виде кольцевойДНК, периодически эмигрирует на периферию бессимптомно или с реактивацией.

Вирус может пойти по восходящему пути→ энцефалит .

Реактивация: солнечный загар, инфекции, ослабление иммунитета, эмоциональный стресс, менструация, хирургические вмешательства на тройничном нерве, применение иммунодепрессантов, трансплантация органов.

Клинические проявления реактивации ВПГ-1: лабиальный герпес, кожного герпеса (особенно лица), кератоконъюнктивит (офтальмогерпес).

Патогенез ВПГ2:

ВПГ-2 - тропизм к эпителию половой сферы.

Первичное заражение - половым путем.

Бессимптомное инфицирование → регионарные (сакральные ) ганглии задних корешков спинного мозга.

Лишь у 1-15% инфицированных через 2-3 дня появляются везикулезно-эрозивные высыпания на эритоматозно-отечной слизистой оболочке половых органов.

Особая опасность - для плода (TORCH ). Плод инфицируется в родовом канале → генерализованный герпес . Кесарево сечение.

Саногенез

При инфицировании - противовирусные АТ, но вирус в присутствии специфических АТ не теряет своей инфекционности.

Главная роль в противовирусной защите при герпетической инфекции - ЦТЛ .

Склонность к генерализации герпеса у больных с дефектами Т-клеточного иммунитета.

Микробиологическая диагностика:

Проводится при стертых или скрытых формах, в предродовом периоде

Материал: отделяемое из высыпаний, кровь.

Цитологический метод (проба Цанка ) - выявление характерных многоядерных гигантских клеток с тельцами включений. РИФ .

Вирусологический метод : выделение вируса на различных культурах клеток, с последующей его идентификацией в реакциях ИФА, РН, РИФ. ПЦР .

Серологический метод : АТ в ИФА. Классы АТ, индекс авидности. АТ к «ранним» белкам вирусов.

Лечение и профилактика:

При тяжелых поражениях назначают ацикловир .

Вакцина герпетическая культуральная инактивированная содержит ВПГ1 и ВПГ2, применяется для лечения больных с герпетическими поражениями в стадию ремиссии не ранее, чем через 2 недели после исчезновения клинических проявлений герпеса, при офтальмогерпесе не ранее, чем через 1 мес.

Вакцинация снижает частоту рецидивов герпетической инфекции.

Varicella- Zoster Virus:

ВГЧ3: Вирус вирус ветряной оспы и опоясывающего герпеса - Varicella- Zoster Virus, (ВОГ, VZV).

Вирус ветряной оспы вызывает распространенную детскую инфекцию - ветряную оспу или ветрянку, персистируя в чувствительных ганглиях, вирус реактивируется в виде опоясывающего герпеса (герпес-зостер), проявляющегося невралгиями и высыпаниями по ходу нервных стволов.

Патогенез VZV-инфекции

Обычно болеют дети (чаще 5-9 лет), чаще легко, без осложнений. Взрослые - тяжелее, с осложнениями.

Источник инфекции - больной человек. Больной заразен за 24 ч до появления сыпи и на протяжении всего периода высыпаний.

Механизм заражения аспирационный, путь заражения - воздушно-капельный.

Входные ворота - эпителий ВДП → первичная репликация → кровь → генерализация.

Главная мишень - клетки базального слоя эпидермиса . Основной симптом - экзантема на коже туловища, реже - лица, шея, конечности, энантема.

Наиболее вероятное осложнение - вторичная пиогенная инфекция везикул. У 15% взрослых пневмонии. Могут развиться постинфекционные энцефалиты и менингиты.

Патогенез VZV-инфекции

Возможно трансплацентарное заражение плода от женщины, заболевшей ветряной оспой во время беременности.

Если с момента инфицирования до родов проходит менее 5 дней - родившийся ребенок может заболеть тяжелой формой ветряной оспы .

Ветряная оспа, перенесенная в первые месяцы беременности, может вызывать тяжелые аномалии развития плода , а в поздние сроки - преждевременные роды .

После выздоровления вирус проникает в регионарные ганглии (любого уровня спинного мозга, тройничного и лицевого нервов) и персистирует в

нейронах в виде кольцевой ДНК.

При воздействии раздражающего

фактора - реактивация - опоясывающий герпес.

Саногенез

После перенесенной ветряной оспы иммунитет на всю жизнь.

Обеспечивая устойчивость к рецидивам ветряной оспы (т.е. к генерализованному процессу), АТ не спасают от местных проявлений реактивации вируса.

Повышенная чувствительность к ОГ у пожилых людей и больных с дефектами клеточного иммунитета.

Материал: содержимое кожных высыпаний, отделяемое слизистой оболочки носоглотки и сыворотка крови.

Цитологический метод: в мазках-отпечатках из очагов кожных поражений, окрашенных по Романовскому-Гимзе или гематоксилином и эозином, - многоядерные гигантские клетки с внутриядерными включениями.

Вирусологический метод : выделение вируса на культуре клеток, куриных эмбрионах и лабораторных животных и идентификация в РИФ, ИФА.

Для быстрой идентификации вируса в материале - РИФ и ПЦР.

Серологический метод : Определение вирусспецифических АТ (IgA, IgM, IgG) в реакциях ИФА и РИА. Сыворотка переболевших опоясывающим герпесом содержит больше специфических АТ, чем сыворотки перенесших ветряную оспу.

Лечение и профилактика

Интерферон, средства, уменьшающие зуд, анальгетики (менавазин). Ацикловир, видарабин.

Живая вакцина против ветряной оспы .

Пациентов с высоким риском развития тяжелой формы инфекции пассивно иммунизируют varicella- zoster- Ig .

Пациента изолируют на дому, изоляция прекращается через 5 дней после появления последнего свежего элемента сыпи. Лица в периоде «высохших корочек» не заразны и могут допускаться в коллектив. Дети дошкольного возраста, находящиеся в контакте с больным и не болевшие ветряной оспой, не допускаются в детские учреждения с 11-го по 21-ый день контакта.

Вирус Эпштейна-Барр:

ВГЧ4 .

1964 - Мишель Эпштейн и Эвелина Барр выделили вирус из лимфомы Беркитта.

Лимфома Беркитта - дети 5-8 лет. Первичная локализация опухоли - верхняя челюсть, хорошо поддается химиотерапии. Центральная Африка, Океания.

Карцинома носоглотки (мужское население Китая).

Внутрилабораторная вспышка инфекционного мононуклеоза .

ВЭБ встречается повсеместно, большинство людей инфицируется в детстве, к трем годам 30-80% (в экономически отсталых странах почти 100% - плотность контактов) становятся носителями ВЭБ.

Вирус Эпштейна-Барр:

Вирус имеет специфические АГ:

EB-VCA - вирусный капсидный АГ,

EB- NA - ядерный АГ,

EB- EA - ранний поверхностный АГ,

ЕВ-МА - мембранный АГ.

Обнаружение раннего поверхностного и ядерного антигенов свидетельствует об острой инфекции ВЭБ, а выявление позднего мембранного и капсидного антигенов - о давнем инфицировании и латентной инфекции.

Культуральные свойства

Вирус размножается только в культуре лимфобластов опухоли Беркитта, клетках крови больных инфекционным мононуклеозом, лейкемических клетках и в культуре клеток мозга здорового человека.

ВЭБ может вызывать лимфоидные неоплазии у мармозеток (маленьких бразильских обезьян-игрунков) и совиных обезьян (похожих на кошку южноамериканских обыкновенных ночных обезьян, или дурукули).

Патогенез ВЭБ-инфекции:

Источник инфекции - больной с бессимптомной или манифестной формами, вирусоносители (после перенесенного заболевания из носоглоточных смывов многих пациентов вирус выделяется до 16 мес.).

Пути заражения :

воздушно-капельный («болезнью поцелуев»);

фекально-оральный механизм, алиментарный путь (при участии контаминированных вирусом пищевых продуктов);

контактно-бытовой;

контактный (половой);

трансфузионный.

Стадии инфекции ВЭБ:

латентная вирусная персистенция;

литическая вирусная репликация.

Латентная инфекция:

постоянное количество копий генома;

ограниченная экспрессия генов;

эписомальный геном;

возможность возникновения новообразований.

Литическая инфекция

острая стадия инфекции;

активное размножение вируса;

цитопатология;

активное выделение вируса во внешнюю среду.

Клетки, поражаемые ВЭБ

В- и Т-лимфоциты;

эпителиальные клетки носоглотки;

железистый эпителий желудка, слюнных желез, щитовидной железы.

Инфекционный мононуклеоз

генерализованная лимфоаденопатия;

лихорадка;

тонзилит;

гепатоспленомегалия;

характерные гематологические изменения (атипичные мононуклеары).

ЛИМФОМА БЕРКИТТА - злокачественная лимфоидная опухоль, локализующаяся, как правило, вне лимфатических узлов в различных органах и тканях (верхняя челюсть, почки, яичники, печень, нервная система и др.).

Микробиологическая диагностика

При инфекционном мононуклеозе в процессе заболевания появляются гетерофильные антитела к эритроцитам различных животных (барана, лошади, быка и др.). В 1932 г. Пауль и Буннель предложили реакцию, основанную на обнаружении в сыворотке крови больного противобараньих агглютининов.

Цитологический метод исследования отпечатков с небных миндалин. Атипичные мононуклеары - инфекционный мононуклеоз.

Цитомегаловирус (ЦМВ)

ВГЧ5.

Гигантские или цитомегалические клетки размером 25-40 мкм с крупными внутриядерными включениями, ограниченными от ядерной мембраны бледным, не воспринимающим окраску ободком (совиный глаз).

Медленная репликация.

Низкая патогенность.

Инфицирование ЦМВ распространено повсеместно, но редко проявляется клинически.

Патогенез:

Источник инфекции - человек.

Механизмы заражения: воздушно-капельный, контактный (в том числе и половой), параэнтеральный, трансплацентарный.

Вирус имеет выраженный тропизм к тканям слюнных желез (при локализованной форме он обнаруживается только в тканях слюнных желез).

ЦМВ поражает клетки разных органов и систем, длительно персистирует в организме и периодически выделяется во внешнюю среду.

Инфекционный процесс : бессимптомная латентная инфекция, либо клинически манифестная (локализованная или генерализованная формы).

Место персистенции - моноциты и макрофаги .

Постнатальное заражение почти всегда бессимптомно .

Инфекционный мононуклеоз, гепатит, пневмония.

ЦМВ - один из главных возбудителей оппуртонистических инфекций : при ослаблении Т-клеточного иммунитета (ВИЧ, у пациентов, принимающих иммунодепрессанты и цитостатики).

Патология плода и новорожденных при ЦМВ-инфекции

Внутриутробное инфицирование обычно проходит незаметно. Но в 5% случаев (чаще при заражении в двух первых триместрах беременности) развивается цитомегалическая болезнь - острая форма инфекции с поражением внутренних органов.

Дефекты развития плода, гепатит и гепатоспленомегалия, тромбоцитопеническая пурпура (геморрагический синдром), гидро- и микроцефалия, хореоретинит.

Примерно в 15% случаев - латентная инфекция: новорожденные отстают в умственном развитии и теряют слух из-за поражения сенсорных центров слухового нерва.

Наибольший риск внутриутробного ЦМВ-инфицирования плода и развития тяжелых форм заболевания отмечается в тех случаях, когда беременная женщина переносит первичную ЦМВИ.

Микробиологическая диагностика

Материал : моча, кровь, вагинальный и цервикальный секрет.

Цитологический метод : обнаружение специфических клеток в осадке мочи и слюны. Крупные клетки с гиперхромным ядром, внутриядерные включения, ядро окружено светлой зоной просветления («совиный глаз»).

Вирусологический метод : выделение вируса на культуре фибробластов, идентификация - РИФ, ПЦР.

Серологический метод : РН, РНГА, ИФА, классы иммуноглобулинов. АТ к возбудителям TORC H-инфекций.

Серологические маркеры ЦМВИ

IgM к предранним белкам

IgG к предранним белкам

IgM к структурным белкам

IgG к структурным белкам

Индекс авидности IgG

Лечение и профилактика

Ганцикловир и фосканет, ингибирующие синтез вирусной ДНК.

В России зарегестрирован зарубежный препарат ЦИТОТЕКТ (иммуноглобулин человека против ЦМВ инфекции для внутривенного введения, Германия).

Вирус герпеса 6 типа

ВГЧ-6.

По разным данным от 80 до 94% обследованных имеют антитела к этому вирусу.

Вероятно участвует в развитии розеолы детской (внезапной экзантемы) или псевдокраснухи у детей раннего возраста, эритемы новорожденных и синдрома хронической усталости (СХУ).

Микробиологическая диагностика. Определение вирусной ДНК в ПЦР и накопления противовирусных АТ в ИФА.

Вирус герпеса человека 7-го типа

ВГЧ-7.

Вирус распространен повсеместно, но неравномерно.

ВГЧ-7 является Т-лимфотропным вирусом, обладающем способностью инфицировать CD4 и CD8 лимфоциты и незрелые Т-клетки.

Предполагается связь между вирусом и СХУ и ВЭ у детей.

Вирус герпеса человека 8-го типа

ВГЧ-8.

В 1995 году из биоптата у пациента с саркомой Капоши были выделены вирусоподобные частицы, содержащие ДНК с элементами гомологии с ВЭБ.

Микробиология: конспект лекций Ткаченко Ксения Викторовна

2. Вирус герпеса

2. Вирус герпеса

Семейство Herpesviridae включает в себя подсемейства:

1) a-herpesviruses (I и II типов, герпес-зостер);

2) b-herpesviruses;

3) g-aherpesviruses.

Относятся к ДНК-овым вирусам. ДНК двухнитевая, линейная. Геном состоит из двух фрагментов: длинного и короткого. Нить ДНК намотана на центральную белковую культуру. Капсидная оболочка построена из простых белков, имеет кубический тип симметрии. Имеется суперкапсидная оболочка (липидная мембрана со слоем гликопротеидов), неоднородная по строению, образует шиповидные отростки.

Герпес-вирусы относительно нестабильны при комнатной температуре, термолабильны и быстро инактивируются растворителями и детергентами.

a-герпес типа I вызывает афтозный стоматит в раннем детском возрасте, лабиальный герпес, реже – герпетический кератит и энцефалит.

a-герпес типа II вызывает генитальный герпес, герпес новорожденных, является предрасполагающим фактором к развитию рака шейки матки.

Герпес-зостер является возбудителем опоясывающего лишая и ветряной оспы. Это типичная герпес-вирусная инфекция. Клинически проявляется появлением пузырьков на коже по ходу ветвей соответствующих нервов. Заболевание протекает тяжело, но быстро наступает выздоровление.

После перенесенной инфекции остается пожизненный иммунитет. Однако возможны рецидивы болезни, связанные с персистенцией вируса в нервных ганглиях.

После перенесенного герпес-вирусного заболевания вирус пожизненно персистирует в нервных ганглиях (чаще тройничного нерва). При снижении защитных сил организма происходит развитие вирусной инфекции.

b-герпес (цитомегаловирус) при размножении в клетках культуры вызывает цитопатические изменения. Имеет сродство с клетками слюнных желез и почек, вызывая в них образование крупных многоядерных включений. При развитии заболевания имеют место вирусемия, поражение внутренних органов, костного мозга, ЦНС, развитие иммунопатологических заболеваний.

g-герпес-вирус (вирус Эпштейна-Бара) вызывает инфекционный мононуклеоз. Может являться предрасполагающим фактором в развитии опухолей.

Диагностика:

1. a-герпес-вирус:

1) выявление характерных многоядерных гигантских клеток с тельцами включений в соскобах из области поражений;

2) культивирование в куриных эмбрионах;

3) биологическая проба;

4) серологические исследования (РСК, ИФА);

5) метод прямой иммунофлюоресценции с моноклональными антигенами.

2. b-герпес-вирус:

1) обнаружение крупных цитомегаловирусных клеток в моче и слюне;

2) культивирование в культуре фибробластов эмбриона человека;

3) серологическое исследование (РСК);

4) иммунофлюоресценция.

3. g-герпес-вирус:

1) выделение вируса в культуре фибробластов;

2) микроскопия мазков осадка мочи, слюны для выявления типичных гигантских клеток;

3) серологические методы (РСК, РПГА и РН).

1) противовирусные препараты (ацикловир);

2) интерферон.

«Зловредный» вирус В 1887 г. в Крыму плантации табака поразила неизвестная болезнь: листья растений покрывались сложным абстрактным рисунком, растекавшимся по листу, словно краска, переливающаяся с одного листа на другой, от одного растения к другому. Сельское хозяйство